大鼠elisa試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。將抗大鼠IL-4單克隆抗體包被在酶標板上；分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本，標準品和樣本中的大鼠IL-4會(huì )與酶標板上的包被抗體充分結合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗體，該抗體會(huì )與板子上包被抗體捕獲的標準品和樣本中的大鼠IL-4發(fā)生特異性結合；洗板后加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標記的鏈霉親和素，生物素與鏈霉親和素會(huì )發(fā)生高強度的非共價(jià)結合；洗板后加入顯色劑底物TMB，若反應孔中樣品存在不同濃度的大鼠IL-4，則HRP會(huì )使無(wú)色TMB變成不同深淺（正相關(guān)）的藍色物質(zhì)，加入終止液后反應孔會(huì )變成黃色；在2max=450nm（OD=450nm）處測定反應孔樣品吸光度（OD），樣本中的大鼠IL-4濃度與OD成正比，通過(guò)繪制標準曲線(xiàn)和四參數擬合軟件便可計算出樣本中大鼠IL-4的濃度。

　　大鼠elisa試劑盒注意事項：

　　1.試劑盒應在有效期內使用，請不要使用過(guò)期的試劑。

　　2.試劑盒未使用時(shí)應保存在2-8℃冰箱，已復溶但未用完的標準品，請丟棄。

　　3.試劑盒使用前請在室溫恢復30min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。

　　4.在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測，且加入試劑的順序應保持一致。

　　5.為避免交叉污染，請在試驗中使用1次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。

　　6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結合物的體積較少，在運輸過(guò)程中微量液體會(huì )沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10S即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請用移液器小心吹打幾次。

　　7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來(lái)源試劑盒內含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。

　　8.為保證結果準確，每次檢測均需做標準曲線(xiàn)。