實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒該染料與雙鏈DNA結合后，能夠產(chǎn)生強度高于SYBR Greenl的熒光。結合了以下諸多優(yōu)勢：熱啟動(dòng)酶、優(yōu)化的緩沖液、*熒光染料，可有效地提高mRNA表達水平檢測的可靠性、重復性和靈敏度。qPCRmix為即用型的2x預混母液，該混合母液經(jīng)過(guò)處理，穩定性高，主要包含：雙鏈DNA結合染料、熱啟動(dòng)酶、MgCl2、dNTPs、反應緩沖液，可確保產(chǎn)生實(shí)時(shí)定量PCR結果。

　　實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒使用注意事項：

　　1.保存

　　未拆封的試劑盒，請于-20℃保存；拆封之后，應在4℃保存。在試劑消耗量較少的實(shí)驗室，可以考慮將試劑盒的按照組分單獨分裝，后保存在-20℃。

　　2.配置

　　試劑盒內所含各組份都是混合物，在靜置情況下會(huì )發(fā)生分層現象，因此，試劑盒現配現用，震蕩混勻，避免反復凍融，避免預混。其中，反復凍融將大幅縮短試劑盒使用壽命。在擴增體系的選擇時(shí)，盡量選擇標準體系，再根據檢材情況加入模板，之后切勿忘記以PCR用水補足擴增體系。

　　3.切勿預混因試劑盒中酶的活性較高，將各組份按照比例混合之后，即使沒(méi)有達到它的合適溫度，但也可能發(fā)生與引物結合，導致實(shí)驗結果出現丟位點(diǎn)或者雜合子純化等情況。

　　4.陰陽(yáng)性參照

　　實(shí)驗結果會(huì )受提取、擴增和電泳等多個(gè)環(huán)節的影響，因此，每次擴增實(shí)驗都應該添加一組陰陽(yáng)性參照。這樣，當結果異常的時(shí)，我們就可以結合陰陽(yáng)性參照的表現，排查問(wèn)題出在哪個(gè)環(huán)節。

　　實(shí)時(shí)熒光PCR試劑盒特點(diǎn)：

　　1.高靈敏度：可定量檢測低拷貝靶基因。

　　2.穩定性增強。

　　3.靈敏度更高，Ct值更小，對PCR反應具有更小的抑制作用。

　　4.熱啟動(dòng)酶性能強勁、可靠。