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人STAT3蛋白抑制分子操作步驟

瀏覽次數:765發(fā)布日期:2021-12-08

人STAT3蛋白抑制分子操作步驟:

  從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;

  隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長(cháng)處測定各孔的OD值。

結果判斷

 繪制標準曲線(xiàn):在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn),按曲線(xiàn)方程計算各樣本濃度值。小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒

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