犬硫酸類(lèi)肝素elisa試劑盒樣本如何進(jìn)行處理檢測
瀏覽次數：547發(fā)布日期：2021-05-10
肝素elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被犬硫酸類(lèi)肝素（HS）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的犬硫酸類(lèi)肝素（HS）呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
肝素elisa試劑盒樣本處理及要求：
1.血清：全血標本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8C1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3.組織勻漿：用預冷的PBS（0.01M，pH=7.4）沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會(huì )影響測量結果），稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1：9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實(shí)驗需要適當調整，并做好記錄。
推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復凍融。再將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4.細胞培養物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃
或-80℃保存，但應避免反復凍融。
注：標本溶血會(huì )影響檢測結果，因此溶血標本不宜進(jìn)行此項檢測。
聯(lián)系QQ：3004972506
聯(lián)系郵箱：sdfskdfhs3004972506@qq.com
傳真：86-021-60443211
聯(lián)系地址：上海嘉定區澄瀏中路3404號
