植物elisa試劑盒使用注意事項
瀏覽次數:410發(fā)布日期:2022-04-20
植物elisa試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時(shí),采用特殊的試劑對植物細胞釋放出來(lái)的蛋白進(jìn)行沉淀,并使用廣譜蛋白酶抑制劑抑制蛋白酶活性,大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性。而且蛋白抽提物呈干粉狀,有利于蛋白質(zhì)的長(cháng)期穩定保存。提取的蛋白,包括膜蛋白,核蛋白,胞質(zhì)蛋白以及在植物組織中含有的稀有蛋白在內的全蛋白。分離得到的蛋白組分可應用于SDS-PAGE、Western blot等。每次可以提取100mg植物組織,本試劑盒可以使用50次。
植物elisa試劑盒注意事項:
1、使用液氮時(shí),請注意戴上防凍手套,避免液氮凍傷。若研磨的組織量較多,可多次加入液氮,保持植物組織處于充分冷凍狀態(tài)時(shí)研磨。
2、植物細胞壁的破碎程度會(huì )影響蛋白的抽提效果。故在步驟3中,盡量將植物組織充分研磨粉碎,以破碎細胞壁,促進(jìn)細胞蛋白的釋放,同時(shí)盡量不要取植物的唯管組織。
3、步驟9中冷凍的固體樣品中含有或多或少的植物纖維,在加入適當的樣品緩沖液對冷凍干燥固體溶解離心后,會(huì )產(chǎn)生植物纖維沉淀,不影響下游實(shí)驗。
4、用含有SDS,尿素等的樣品緩沖液對冷凍干燥的樣品進(jìn)行溶解,有助于疏水性蛋白質(zhì)的*溶解。
5、如果用于2D電泳,可以將蛋白質(zhì)沉淀用酒精:乙醇(1:1VV)對進(jìn)行震蕩洗滌,可以進(jìn)一步減少沉淀中的鹽和有機物殘留,或用2D樣品清潔試劑盒(786-124),減少鹽和有機物殘留,一般情況下沒(méi)有必要。
6、可以采用非干擾型蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒(SK3071)或改良型Lowry法蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒(SK4041)對提取樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量。
7、對于SDS-PAGE電泳,可以采用我公司生產(chǎn)的新型快速考馬斯藍染色液(BSPO15)或新蛋白質(zhì)考馬斯亮藍染色試劑盒(BSP007)對膠進(jìn)行染色。
8、Solution A和SolutionB易揮發(fā),有一定的腐蝕性,刺激性氣味和易燃性,實(shí)驗時(shí)避免與皮膚接觸且具有一定的,請戴上一次性手套,在化學(xué)通風(fēng)櫥中進(jìn)行,并注意遠離明火。
9、使用后,請立即旋緊瓶蓋,防止溶液揮發(fā)和與空氣的物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應。
10、本試劑盒只能夠用于體外實(shí)驗,不能夠用于臨床、治療和動(dòng)物體內實(shí)驗等。